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Nov 09, 2023

Nuevos nanoconjugados de plata biogénica de extractos de semillas de Abrus precatorius y sus eficacias antiproliferativas y antiangiogénicas

Scientific Reports volumen 13, Número de artículo: 13514 (2023) Citar este artículo 997 Accesos 1 Altmetric Detalles de métricas Los nanoconjugados de plata biogénicos (AgNC), derivados de plantas medicinales, han sido

Scientific Reports volumen 13, número de artículo: 13514 (2023) Citar este artículo

997 Accesos

1 altmétrica

Detalles de métricas

Los nanoconjugados de plata biogénicos (AgNC), derivados de plantas medicinales, han sido ampliamente explorados en el campo de la biomedicina. Se sintetizaron por primera vez AgNC utilizando extractos de semillas de acetato de etilo de Abrus precatorius y se evaluaron sus eficacias antiproliferativas y antiangiogénicas contra el carcinoma cervical y oral. Para la caracterización de AgNC se utilizaron espectrofotometría ultravioleta-visible, dispersión dinámica de luz (DLS) y microscopía electrónica de barrido (SEM). La actividad antiproliferativa se investigó mediante MTT, fragmentación de ADN y ensayos de actividad de enzimas antioxidantes in vitro. Se utilizó el modelo de membrana corioalantoidea (CAM) de pollo in vivo para evaluar la actividad antiangiogénica. Se identificaron un total de 11 compuestos en ambos extractos en el análisis GCMS. Las AgNC sintetizadas tenían forma esférica con un tamaño promedio de 97,4 nm para AgAPE (Sox) y 64,3 nm para AgAPE (Mac). Las AgNC poseían una inhibición eficaz contra las células Hep2C y KB. En las células Hep2C, AgAPE (Mac) reveló la mayor actividad de SOD, catalasa, GST y un menor contenido de MDA, mientras que AgAPE (Sox) mostró el mayor contenido de GSH. Por otro lado, en las células KB, AgAPE (Sox) exhibió mayor SOD, actividad GST, contenido de GSH y menor contenido de MDA, mientras que AgAPE (Mac) mostró los niveles más altos de actividad catalasa. El análisis de acoplamiento reveló una afinidad de unión máxima del safrol y el ácido linoleico con objetivos seleccionados. El tratamiento con AgAPE (Sox) y AgAPE (Mac) redujo profundamente el grosor, la ramificación y el brote de los vasos sanguíneos en los embriones de pollo. Este estudio indica que las AgNC derivadas de A. precatorius tienen mayor eficacia contra el carcinoma cervical y oral, así como contra la angiogénesis, lo que potencialmente limita el crecimiento tumoral.

El cáncer ha sido una de las principales causas de muerte a nivel mundial durante varias décadas1. Según la Agencia Internacional para la Investigación del Cáncer (IARC), en 2020 se notificaron aproximadamente 10,0 millones de muertes por cáncer y 19,3 millones de casos nuevos en todo el mundo1. En la India, se preveía que 26,7 millones de personas desarrollarían cáncer para 2021, y se proyectaba que ese número aumentaría. a 29,8 millones en 20252. Por tanto, una de las estrategias más plausibles es desarrollar fármacos antineoplásicos potentes y eficaces destinados a combatir el cáncer.

La nanotecnología es hoy en día uno de los enfoques más utilizados en la investigación del cáncer y ha dilucidado un inmenso potencial en el diagnóstico y tratamiento del cáncer3. Las nanopartículas (NP) o nanoconjugados (NC) son partículas a nanoescala con un tamaño de 1 a 100 nm y han demostrado un potencial terapéutico para una amplia gama de enfermedades debido a sus propiedades y características fisicoquímicas4. Además, el sistema de administración de fármacos basado en nanoconjugados supera los métodos convencionales de administración de fármacos en términos de eficacia al: (1) aumentar la vida media de los fármacos y proteínas que son susceptibles a la degradación; (2) mejorar la solubilidad de fármacos hidrofóbicos; y (3) permitir la liberación controlada y dirigida del fármaco en el lugar de la enfermedad5.

En los últimos años, la nanotecnología se ha centrado en el desarrollo de métodos óptimos para la preparación de NC metálicas6. El enfoque de síntesis verde se considera el más rentable, duradero, confiable y ambientalmente sostenible para la síntesis de CN. Se ha demostrado que las AgNC son potentes sustancias bioactivas con amplias aplicaciones terapéuticas que incluyen actividades antibacterianas, antifúngicas, antioxidantes, antiproliferativas, cicatrizantes y antiinflamatorias7,8,9. Las AgNC se han explorado recientemente en terapias anticancerígenas para las líneas celulares HT-2910, MCF-7, A54911 y Vero12. A pesar de las numerosas ventajas de los nanoconjugados como sistemas de administración de fármacos, actualmente sólo existen unos pocos fármacos nanoconjugados en el mercado para el tratamiento del cáncer, como Doxil®, Eligard®, Abraxane®, Genexol PM®, Onivyde®, etc.5. Por lo tanto, la investigación destinada a desarrollar sistemas de administración de fármacos basados ​​en nanoconjugados derivados de recursos naturales ha recibido considerable atención por parte de investigadores de todo el mundo para mejorar la eficacia de la terapia contra el cáncer.

En este estudio, utilizamos acetato de etilo Abrus precatorius Linn. extractos de semillas (APE (Sox)/(Mac)) como agente reductor durante la síntesis verde de AgNC. A. precatorius pertenece a la familia Fabaceae y al género Abrus. Sus semillas y hojas poseen una gran cantidad de propiedades medicinales, incluidas antiproliferativas y anticancerígenas. Los efectos terapéuticos informados se atribuyeron a la presencia de numerosos compuestos bioactivos, incluidos flavonoides, terpenoides, estigmasterol y una variedad de alcaloides13,14.

Hasta donde sabemos, no se ha publicado antes ningún informe relacionado con la síntesis de nanoconjugados de plata biogénica utilizando extracto de semilla de acetato de etilo de A. precatorius como agente reductor sin la adición de agentes reductores y de protección externos. Creemos que el empleo de extractos de A. precatorius puede ser un enfoque eficaz para sintetizar las nuevas AgNC con posibles actividades biológicas. Por lo tanto, el estudio actual se centró en la biosíntesis verde de nanoconjugados de plata utilizando extractos de semillas de acetato de etilo de A. precatorius y la evaluación de sus eficacias antiproliferativas y antiangiogénicas utilizando modelos in vitro e in vivo.

Los análisis GC-MS de los extractos de semillas de APE (Sox) y APE (Mac) de A. precatorius mostraron la misma cantidad de compuestos con diferente concentración porcentual. Se identificaron un total de 11 compuestos en ambos extractos. Los extractos de semillas de A. precatorius produjeron compuestos compuestos principalmente de acetales, hidrocarburos, fenilpropanoides, alcanotioles, ácidos carboxílicos, aldehídos, ácidos grasos y algunos otros fitoquímicos esenciales. El perfil del análisis detallado de la composición química de los extractos de semillas de A. precatorius se resume en la Tabla 1 y la Fig. 1.

Cromatogramas GC-MS de extractos de semillas de A. precatorius: (A) APE (Sox) y (B) APE (Mac).

El análisis de acoplamiento analizó las afinidades de unión de los compuestos identificados en GC-MS contra receptores de cáncer de cuello uterino y oral como ER, GCR, PR, HER2, VEGF y FGFR2. En comparación con otros ligandos y el 5-fluorouracilo (estándar), el análisis de acoplamiento mostró que el safrol tenía la mayor afinidad de unión por HER2, GCR, FGFR2, PR y ER. De manera similar, el ácido linoleico tuvo la mayor afinidad de unión por HER2, PR y ER (Tabla 2, Fig. 2). Utilizando el cliente Discovery Studio 2021, los complejos acoplados se visualizaron aún más para determinar sus interacciones moleculares, como se ilustra en la Fig. 2.

Acoplamiento molecular de ácido linoleico, safrol y su interacción con aminoácidos, donde; (A – C) interacciones del ácido linoleico con aminoácidos de ER, PR, HER2 y (D – H) interacciones del safrol con aminoácidos de GCR, PR, ER, HER2 y FGFR-2 del carcinoma cervical y oral.

El cambio de color de la mezcla de verde claro a marrón rojizo y marrón oscuro indicó la formación de AgNC como se muestra en la Fig. 3A. Como se muestra claramente en la Fig. 3B, AgAPE (Sox) y AgAPE (Mac) tienen un pico de absorbancia característico de AgNC a aproximadamente 400 nm y 396 nm, respectivamente, debido a los electrones de resonancia de plasmón superficial (SPR) presentes en la superficie de la nanopartícula. Mientras que APE (Sox), APE (Mac) y AgNO3 no exhibieron bandas SPR.

Biosíntesis de nanoconjugados de plata, donde (A) cambios de color en APE (Sox) y APE (Mac) después de la adición de nitrato de plata para la síntesis de nanoconjugados y (B) espectros UV-Vis del extracto de semillas de A. precatorius Sox y Mac y su biosintetización verde AgNCs junto con control (AgNO3).

Se observó que a pH 6 (Fig. 4A, D), las AgNC exhibieron un pico de absorción más bajo que a pH 8 y 10. Sin embargo, en las AgNC a pH 10, se observó un ensanchamiento del pico y un cambio en la longitud de onda a partir de la séptima semana. tanto para AgAPE (Sox) como para AgAPE (Mac) (Fig. 4C, F). Las bandas de absorción características de AgAPE (Sox) y AgAPE (Mac) a pH 8 se observaron alrededor de 400 nm y 396 nm, respectivamente, con un cambio insignificante en λmax durante el estudio de 8 semanas, por lo que se encontró que eran estables (Fig. 4B). ,MI). Se investigó que el color del medio de reacción y la fuerza del pico SPR de las AgNC dependían del pH, mostrando un aumento en la absorción con el aumento del pH.

Análisis de optimización y estabilidad de AgNC a diferentes pH (6, 8 y 10) durante 8 semanas; donde, (A – C) AgAPE (Sox) y (D – F) AgAPE (Mac).

Se utilizó espectroscopía FT-IR para identificar grupos funcionales involucrados en la reducción y limitación de AgNC de A. precatorius. El espectro FT-IR de APE (Sox) mostró picos de absorción importantes en 3319, 2974, 1744, 1088 y 1043 cm-1 y APE (Mac) mostró picos de absorción importantes en 3328, 2974, 1747, 1088 y 1043 cm-1 (Figura 5). El espectro FTIR de AgAPE (Sox) mostró picos de absorción importantes en 3300, 2979, 1639, 1091 y 1046 cm–1 y AgAPE (Mac) mostró picos de absorción importantes en 3289, 2983, 1639, 1090 ad 1046 cm−1, lo que significa la presencia de fitoconstituyentes que actúan como agentes de protección (Fig. 5).

Espectros FT-IR de APE (Sox), APE (Mac), AgAPE (Sox) y AgAPE (Mac).

Como se muestra en la Fig. 6A, el tamaño de partícula zeta promedio resultante (promedio Z (d. nm)) de AgAPE (Sox) fue de 99,30 nm, con un índice de polidispersidad (PDI) de 0,5 a pH 8. De manera similar, el tamaño promedio resultante El tamaño de partícula zeta (promedio Z (d. nm)) de AgAPE (Mac) fue de 94,04 nm, con un PDI de 0,9, a pH 8, como se muestra en la Fig. 6B. Además, se observó que el potencial zeta promedio resultante de AgAPE (Sox) y AgAPE (Mac) era − 25,2 mV y − 18,1 mV, respectivamente, como se muestra en las figuras 6C y D.

Análisis dinámico de dispersión de luz y potencial Zeta de AgNC sintetizadas a partir de extractos de semillas de A. precatorius a pH 8, donde (A, B); Distribución del tamaño de partículas de AgAPE (Sox) y AgAPE (Mac) y (C, D); Potencial Zeta de AgAPE (Sox) y AgAPE (Mac).

Las imágenes SEM ilustraron que ambas AgNC biogénicas tenían forma esférica. El análisis SEM de AgNC biogénicas reveló diferencias claras en el tamaño de AgAPE (Sox) y AgAPE (Mac) que van de 97,4 a 107,1 nm y de 64,3 a 111,0 nm, respectivamente (Fig. 7A, B).

Análisis con microscopía electrónica de barrido (SEM) de AgNC sintetizadas utilizando extractos de semillas de A. precatorius; donde, (A) AgAPE (Sox) y (B) AgAPE (Mac).

Los resultados cuantitativos de los espectros EDX de AgNC mostraron un rendimiento de plata de 5,29% y 27,12% (% en peso) en AgAPE (Sox) y AgAPE (Mac), respectivamente (Fig. 8A, B). Los picos de absorción de Ag en ambos AgNC sintetizados se observaron a 3 keV. Por otro lado, también se detectaron algunas otras señales, incluidos carbono y oxígeno, en ambas AgNC sintetizadas, como se muestra en (Fig. 8A, B).

Espectro EDX de AgNC sintetizadas; donde, (A) AgAPE (Sox) y (B) AgAPE (Mac).

Como se muestra en la Tabla 3 y en la Fig. 9I y (Gráfico 1 complementario), se observó que AgAPE (Mac) tenía una actividad antiproliferativa significativamente mayor que AgAPE (Sox) en células Hep2C, con un valor de CI50 de 8,49 ± 0,40 µg/ml. Además, el 5-fluorouracilo mostró un valor de IC50 de 279,00 ± 4,65 µg/mL. Por el contrario, AgAPE (Sox) mostró una actividad antiproliferativa significativamente mayor que AgAPE (Mac) en células KB, con un valor de IC50 de 0,20 ± 0,01 µg/ml. Además, el 5-fluorouracilo mostró un valor de IC50 de 257,92 ± 9,98 µg/mL (Fig. 9II) y (Gráfico 1 complementario). Además, el estudio morfológico bajo microscopía óptica mostró que las células no tratadas tenían forma de huso, mientras que la mayoría de las células Hep2C y KB tratadas presentaban alteraciones citomorfológicas. Se observó contracción celular, formación de ampollas en la membrana y fragmentación nuclear en cuerpos apoptóticos en células tratadas con AgNC (Fig. 9A-L).

Eficacia antiproliferativa de AgNC en células Hep2C y KB: (I, II); La comparación de la IC50 promedio entre AgNC y el estándar (5-fluorouracilo) durante 48 h. Valores de p significativos; (*) p = 0,0114, (****) p < 0,0001 se obtuvieron utilizando el ANOVA unidireccional. (A – F) y (G – L); Alteraciones morfológicas (las puntas de flecha amarillas indican las células que experimentan apoptosis; las puntas de flecha rojas indican células vivas) en células Hep2C y KB utilizando valores específicos de IC50 de AgNC y fármaco estándar después de 48 h de incubación. Barra de escala: 100 μm.

Como se muestra en la Fig. 10, no se observó ningún patrón de escalera de ADN en células no tratadas. En las células tratadas con AgAPE (Sox)/(Mac), el patrón de escalera de ADN (entre 300 y 1000 pb) se indujo notablemente tanto en células Hep2C (bandas fuertes) como en células KB (bandas muy ligeras), comparable al tratamiento con 5-fluorouracilo.

Fragmentación del ADN de líneas celulares Hep2C y KB después del tratamiento con AgNC de A. precatorius al valor IC50 durante 48 h. M: marcador de ADN (1 kb); UN1: no tratado (células Hep2C); 1: AgAPE (Medias); 2: AgAPE (Mac); UN2: no tratado (células KB); 3: AgAPE (Medias); 4: AgAPE (Mac); F1: control positivo (5-fluorouracilo) en células Hep2C; F2: Control positivo (5-Flourouracilo) en células KB.

Como se muestra en la Fig. 11A, en las células Hep2C, AgAPE (Mac) tuvo la mayor actividad de SOD (12,71 ± 1,17 U/min/mg de proteína) en comparación con AgAPE (Sox) (7,0 ± 0,38 U/min/mg de proteína). y células de control (4,15 ± 0,20 U/min/mg de proteína). Asimismo, en células KB, AgAPE (Sox) exhibió la mayor actividad de SOD (5,33 ± 0,42 U/min/mg de proteína) en comparación con AgAPE (Mac) (4,47 ± 1,0 U/min/mg de proteína) y las células de control ( 0,36 ± 0,04 U/min/mg de proteína).

(A – C) Actividad enzimática antioxidante de AgNC derivadas de A. precatorius en células Hep2C y KB, donde (A); Actividad SOD de AgAPE (Sox) y AgAPE (Mac), (B); Actividad CAT de AgAPE (Sox) y AgAPE (Mac), (C); Actividad GST de AgAPE (Sox) y AgAPE (Mac), (D, E); Contenido no enzimático de AgNC derivadas de A. precatorius en células Hep2C y KB, donde (D); Contenido de GSH de AgAPE (Sox) y AgAPE (Mac) y (E); Contenido de MDA de AgAPE (Sox) y AgAPE (Mac). Los datos representados se obtuvieron de tres experimentos realizados de forma independiente. *p ≤ 0,05, **p ≤ 0,01, ***p ≤ 0,001.

En las células Hep2C, AgAPE (Mac) tuvo la mayor actividad de la enzima catalasa (3,02 ± 0,62 µmol/min/mg de proteína) en comparación con AgAPE (Sox) (1,02 ± 0,35 µmol/min/mg de proteína) y las células de control (0,23 µmol/min/mg de proteína). ± 0,03 µmol/min/mg de proteína). Además, en las células KB tratadas con AgAPE (Mac) y AgAPE (Sox) se mostraron (0,76 ± 0,02 µmol/min/mg de proteína) y (0,67 ± 0,04 µmol/min/mg de proteína), respectivamente, en comparación con las células de control, es decir , 0,40 ± 0,09 µmol/min/mg de proteína, como se muestra en la Fig. 11B.

En las células Hep2C, se encontró que la actividad de GST era más alta tras el tratamiento con AgAPE (Mac), es decir, (72,88 ± 4,08 µmol/min/mg de proteína) en comparación con AgAPE (Sox), es decir, 67,37 ± 2,68 µmol/min/ mg de proteína y células de control (53,52 ± 2,40 µmol/min/mg de proteína. En las células KB, el tratamiento con AgAPE (Sox) mostró la mayor actividad, es decir, 71,91 ± 6,65 µmol/min/mg de proteína en comparación con AgAPE (Mac) ( 68,64 ± 2,36 µmol/min/mg de proteína) y células de control, es decir, 52,95 ± 1,92 µmol/min/mg de proteína como se muestra en la Fig. 11C.

Tras el análisis cuantitativo, descubrimos que las células tratadas con Hep2C con AgAPE (Sox) mostraban el mayor contenido de glutatión, con 4539,70 ± 35,34 µg/mg de proteína en comparación con AgAPE (Mac), que tenía un contenido de glutatión de 4316,56 ± 51,52 µg/mg de proteína y células de control (3579,56 ± 41,89 µg/mg de proteína). Por el contrario, las células KB tratadas con AgAPE (Sox) tuvieron el mayor contenido de GSH (6973,74 ± 109,13 µg/mg de proteína) en comparación con AgAPE (Mac) (4841,34 ± 136,18 µg/mg de proteína) y las células control (3974,65 ± 66,03 µg /mg de proteína) como se muestra en la Fig. 11D.

En células Hep2C, la exposición a AgAPE (Sox) mostró una marcada disminución en el contenido de MDA (0,12 ± 0,02 µg/mg de proteína), en comparación con AgAPE (Mac) (0,19 ± 0,01 µg/mg de proteína) y células de control. (0,31 ± 0,04 µg/mg de proteína), respectivamente. Por el contrario, se encontró que el contenido de MDA en las células KB era menor tras el tratamiento con AgAPE (Sox), es decir, 0,01 ± 0,01 µg/mg de proteína, mientras que las células tratadas con AgAPE (Mac), que mostraban un contenido de MDA de hasta (0,05 ± 0,01 µg/mg de proteína) en comparación con no tratado (control), es decir, 0,18 ± 0,03 µg/mg de proteína (Fig. 11E).

La capacidad de AgAPE (Sox), AgAPE (Mac) y 5-Flourouracilo para inhibir la angiogénesis in vivo se determinó mediante el ensayo CAM. Se utilizó agua como control del vehículo. Se observó neovascularización prominente en el tratamiento con agua (control de vehículo). Se utilizó 5-fluorouracilo (300 µg/huevo) como fármaco estándar, mostrando una inhibición de la angiogénesis del 65,27%. Como se muestra en la Fig. 12A, los grupos tratados con concentraciones crecientes de AgAPE (Sox) (12,5, 50 y 200 µg/huevo) mostraron una inhibición dependiente de la dosis de la formación de vasos corioalantoideos en 58,11, 77,55 y 84,91%, mientras que AgAPE (Mac) mostró inhibición. de formación de vasos corioalantoideos en 57,22, 85,77 y 87,38%, respectivamente (Fig. 12B). Se observó un bloqueo significativo de la angiogénesis en la CAM a la concentración de 200 µg/huevo de AgAPE (Sox) y AgAPE (Mac) en comparación con el 5-fluorouracilo (estándar), lo que sugiere que las AgNC eran capaces de restringir la angiogénesis in vivo. .

(A) Imágenes morfológicas de CAM después del tratamiento con control de vehículo (agua), AgNC y 5-fluorouracilo, (B) Porcentaje de inhibición de la angiogénesis tras el tratamiento con 5-fluorouracilo (estándar) y AgNC de manera dependiente de la dosis. Los valores se expresan como porcentaje de inhibición promedio (n = 3). *p ≤ 0,05, ***p ≤ 0,001, ns: no significativo frente a 5-fluorouracilo.

El cáncer sigue planteando una amenaza para la salud mundial debido a la falta de intervenciones farmacológicas eficaces. La escasa eficacia de los fármacos quimioterapéuticos disponibles se atribuye a la diseminación de células malignas desde un tumor primario a otros tejidos, lo que se ve impedido por una baja administración y una alta toxicidad15. La terapia dirigida se ha desarrollado como resultado de las deficiencias de los fármacos quimioterapéuticos ya disponibles para mejorar la administración de fármacos y reducir los efectos adversos. Los enfoques basados ​​en la nanotecnología, como los fármacos basados ​​en nanoconjugados metálicos, pueden superar estas limitaciones y desempeñar un papel importante en la terapia dirigida16. Las AgNC biosintetizadas en verde han demostrado una potencia prometedora para aplicaciones biomédicas en las últimas décadas. Las AgNC son conocidas por sus potentes propiedades antimicrobianas, inhibición eficiente de la proliferación de células tumorales, potentes efectos antiinflamatorios y cicatrizantes17. Teniendo todo lo anterior en mente, el estudio actual fue diseñado para sintetizar AgNC biogénicas derivadas de A. precatorius de extractos de semillas de acetato de etilo y evaluar su actividad enzimática antiproliferativa y antioxidante in vitro y su actividad antiangiogénesis in vivo utilizando el modelo CAM. . Además, evaluamos la afinidad de unión de los compuestos identificados mediante análisis GC-MS contra receptores que median las vías de señalización en el carcinoma cervical y oral.

La preparación del extracto de la planta es el paso previo y más crucial para la extracción de fitoconstituyentes que sirven como agentes reductores y protectores para las AgNC18. La extracción de fitoconstituyentes está altamente influenciada por el tipo de proceso de extracción, tipo de solvente, parte de la planta y temperatura, pudiendo influir en el rendimiento y extracción de compuestos19,20. En el presente estudio, se empleó extracción soxhlet y maceración para preparar los extractos de semillas de A. precatorius. La literatura cita que se extraen diferentes compuestos utilizando diferentes métodos de extracción21. Curiosamente, en el estudio actual los resultados de FT-IR mostraron los mismos grupos funcionales en ambos extractos. De manera similar, según los análisis de GC-MS, se encontró que existen fitoquímicos idénticos en diferentes concentraciones porcentuales en los extractos de semillas de APE (Sox) y APE (Mac) de A. precatorius (Tabla 1 y Fig. 1). Según el área del pico, el compuesto más dominante en los extractos de semillas de APE (Sox) y APE (Mac) fue el ácido 9-octadecenoico con 55,19 % y 39,18 %, respectivamente. Un estudio previo sobre el extracto metanólico de semilla de A. precatorius informó una abundancia del 7,42% de ácido 9-octadecenoico17, que posee varias actividades biológicas, incluidas propiedades anticancerígenas22. Además, el ácido linoleico (13,38%) fue el segundo compuesto más predominante en el extracto de A. precatorius APE (Sox) en comparación con un estudio anterior sobre el extracto de semilla etanólico (1,42%)23. El ácido linoleico posee actividades antitumorales y anticancerígenas, suprimiendo así el crecimiento de las células cancerosas al inducir estrés oxidativo y disfunción mitocondrial24. Sin embargo, el segundo compuesto más predominante en APE (Mac) fue el 2-Tridecenal (9,11%), que se informa aquí por primera vez en el extracto de semilla de acetato de etilo de A. precatorius. La literatura cita que posee propiedades saborizantes y aromáticas25. En un estudio previo se identificaron 20 compuestos en extracto metanólico de semilla de A. precatorius17; de estos, tres (ácido hexadecanoico, ácido 9-octadecanoico y ácido linoleico) fueron detectados en nuestros extractos, los cuales se consideran potenciales fitoquímicos conocidos por sus actividades antioxidantes, anticancerígenas, antivirales, antiinflamatorias, antiandrogénicas y hepatoprotectoras22,26. Curiosamente, este es el primer informe sobre extractos de semillas de A. precatorius donde también se identificó safrol hasta 2,15 y 5,03 % en APE (Sox) y APE (Mac), respectivamente. El safrol es bien conocido por sus potenciales actividades antioxidantes, antidiabéticas, antibacterianas, antifúngicas y anticancerígenas27.

Los fitoquímicos identificados pueden explorarse como posibles fármacos candidatos que pueden inhibir eficazmente objetivos en sitios receptores (GCR, HER2, VEGF, FGFR2 y ER y PR) asociados con el desarrollo y la progresión del cáncer cervical y oral28,29,30,31,32 . Según nuestra investigación in-silico, el safrol tenía la mayor afinidad de unión por HER2 (- 7,6 kcal/mol), seguido del ácido linoleico (- 7,0 kcal/mol), en comparación con el estándar (5-fluorouracilo) - 5,9 kcal/mol. moles. Un estudio anterior informó que la rutina y el ácido tánico tenían afinidades de unión prominentes para PR, GCR, HER2 y ER33. El ácido linoleico y el ácido 9-octadecenoico también mostraron afinidades de unión prometedoras con ER (-6,2 y -5,6 kcal/mol, respectivamente). Un estudio reciente informó resultados comparables de ER con ácido linoleico y 9-octadecenoico con energías de unión de −5,5 y −4,2 kcal/mol, respectivamente34. Estos hallazgos sugieren que las moléculas bioactivas identificadas en los extractos de semillas de A. precatorius probablemente sean efectivas contra las proteínas objetivo.

Los hallazgos anteriores nos llevaron a sintetizar aún más las AgNC biogénicas utilizando extractos de semillas de acetato de etilo de A. precatorius. Los extractos de semillas redujeron el nitrato de plata (AgNO3) a colores marrón rojizo y marrón oscuro, lo que indica la formación de AgNC biogénicas. El fenómeno de resonancia de plasmón superficial (SPR) podría atribuirse a la excitación y reducción de AgNO335. El control (AgNO3) no desarrolló color ni mostró la banda característica, lo que indica que no se produjo reducción de AgNO3 en las condiciones utilizadas. Además, los fitoquímicos de A. precatorius comprenden grupos funcionales hidroxilo y amino en abundancia, que son conocidos por sus eficaces propiedades reductoras y de protección de metales, lo que proporciona a las AgNC un recubrimiento duradero en una reacción de un solo paso14,33.

Además, las AgNC sintetizadas se optimizaron en diferentes condiciones de pH y se estudió la estabilidad de las AgNC durante 8 semanas. Curiosamente, el pico de absorbancia de las AgNC aumenta al aumentar el pH, y la fabricación máxima de las AgNC se produjo a pH 8, excepto a pH 6 y pH 10. De manera similar, estudios previos también han informado efectos de pH comparables36,37. Por lo tanto, inferimos que la síntesis de AgNC se lleva a cabo mejor a un pH alcalino de 8, lo que puede deberse al mayor grado de ionización que podría producir potentes ligandos complejantes para los iones de plata (48), dando como resultado iones de plata más complejos. compuestos. Esto puede afectar positivamente la capacidad de los fitoconstituyentes presentes en los extractos de A. precatorius para bloquear los iones de plata y promover su reducción. Sin embargo, en una solución de pH 6, el proceso de biosorción competitiva y la protonación de hidroxilo pueden ser los principales factores que ralentizan la formación de AgNC y en una solución de pH 10, se observó un ensanchamiento del pico y un cambio en la longitud de onda que pueden haber sido causados ​​por la aglomeración36,38.

Las AgNC optimizadas a pH 8 se caracterizaron aún más. En el estudio actual, el PDI observado indica la distribución polidispersa de las AgNC biogénicas. Además, el potencial zeta mide la fuerza de atracción o repulsión de la carga electrostática entre partículas suspendidas en un líquido39. Se descubrió que el potencial zeta de las AgNC biosintetizadas de A. precatorius era negativo. Debido a su potencial zeta altamente negativo, las AgNC eran claramente de naturaleza polidispersa; como resultado, la fuerza de repulsión electrostática entre ellos previene la aglomeración de NC y ayuda enormemente a la estabilidad a largo plazo de las soluciones40,41.

Los espectros FT-IR de los extractos de semillas de A. precatorius correspondientes a AgNC derivadas de A. precatorius mostraron cambios mayores y menores de los picos razonablemente debido a la reducción, limitación y estabilización de los nanoconjugados sintetizados36. Se observó un cambio para el pico en 3319 cm1 a una longitud de onda más baja de 3300 cm-1 en AgAPE (Sox) y se observó un cambio similar de 3328 a 3289 cm-1 en AgAPE (Mac) debido a la participación del O– Estiramiento H o N – H de compuestos fenólicos que están presentes en los extractos de semillas42. Los picos de absorción a 2974 cm-1 en APE (Sox y Mac), 2979 cm-1 en AgAPE (Sox) y 2983 cm-1 en AgAPE (Mac) se deben al estiramiento C-H del grupo metileno o grupo alifático43 . La banda de 1744 cm-1 se desplazó a una longitud de onda inferior de 1639 cm-1 en AgAPE (Sox) y la banda de 1737 cm1 a 1639 cm1 muestra la participación del estiramiento C=C de alquenos o compuestos aromáticos44. Las vibraciones a 1088, 1090 y 1091 cm1 en AgAPE (Sox y Mac), AgAPE (Mac) y AgAPE (Sox), indican respectivamente las vibraciones de estiramiento C-N de aminas alifáticas45. La banda a 1046 cm-1 en AgAPE (Sox y Mac) y 1043 cm-1 en APE (Sox ad Mac) mostró el estiramiento O-H de los grupos fenol44.

Además de eso, las imágenes SEM confirmaron la forma esférica de las AgNC sintetizadas por A. precatorius. AgAPE (Sox) osciló en tamaño entre 97,4 y 107,1 nm, mientras que AgAPE (Mac) osciló entre 64,3 y 111,0 nm. Investigaciones anteriores sobre el extracto de hoja de A. precatorius mostraron la formación de nanoconjugados de forma esférica con diámetros que oscilan entre 19 y 35,4 nm46. La composición elemental de nuestras AgNC sintetizadas se analizó utilizando un espectro de rayos X de energía dispersiva (EDX). Además, la espectroscopía EDX proporciona detalles tanto cuantitativos como cualitativos sobre los elementos que estaban presentes en las NC. El pico a 3 keV se observó debido a la SPR de Ag, lo que indica la formación exitosa de AgNC47. Los picos de difracción de EDX observados para el carbono y el oxígeno sugirieron que las AgNC fueron tapadas con éxito por los compuestos orgánicos extracelulares de los extractos de semillas de A. precatorius en la superficie de las AgNC, o en sus proximidades48.

Los nanoconjugados han ganado popularidad en la terapia contra el cáncer durante la última década debido a su capacidad para unirse selectivamente y atacar las células cancerosas49. Informamos aquí por primera vez las posibles eficacias antiproliferativas de las AgNC biogénicas derivadas de A. precatorius en células Hep2C y KB. Nuestros resultados demostraron que ambos AgNC (AgAPE (Sox)/(Mac)) exhibieron actividad antiproliferativa de manera dosis dependiente. Curiosamente, AgAPE (Mac) y AgAPE (Sox), con valores de CI50 de 8,49 ± 0,4 µg/ml y 33,50 ± 0,95 µg/ml, respectivamente, fueron más eficaces para inhibir las células de cáncer de cuello uterino (Hep2C). Estudios previos en células Hep2C sugirieron que los valores de IC50 para los extractos de semillas de A. precatorius APE (Mac) y APE (Sox) fueron 85,91 ± 6,7 µg/mL y 142,80 ± 6,24 µg/mL, respectivamente33. Esto infiere que la eficacia de las AgNC biogénicas sintetizadas a partir de extractos de semillas de acetato de etilo de A. precatorius contra las células Hep2C se ha mejorado sustancialmente. De manera similar, en las células de cáncer oral (KB), AgAPE (Sox) y AgAPE (Mac) mostraron la inhibición más prometedora con un valor de IC50 de 0,20 ± 0,01 µg/mL y 20,80 ± 0,99 µg/mL, respectivamente. Una investigación similar sobre AgNC del extracto de Thuja occidentalis en células KB reveló citotoxicidad a una dosis de 25 µg/ml50.

Un mecanismo importante por el cual las AgNC son tóxicas para las células cancerosas es a través del estrés oxidativo causado por las especies reactivas de oxígeno (ROS). La eficacia antiproliferativa mejorada de las AgNC podría atribuirse a una sinergia entre las AgNC y las moléculas bioactivas que las recubren. Se propone que la citotoxicidad superior de las AgNC contra las células cancerosas puede deberse a una mayor absorción de nanoconjugados, porque las células cancerosas tienen un metabolismo anormal y una alta tasa de proliferación, lo que las hace más vulnerables51,52.

Además, la inducción de apoptosis se confirmó mediante la técnica de escalera de ADN en células tratadas con AgNC. La apoptosis se caracteriza por la fragmentación del ADN nuclear en pares de bases provocada por la activación de nucleasas endógenas. Se ha demostrado que la activación de caspasa promueve la apoptosis, activa la ADNasa y daña el ADN53. En el estudio actual, el tratamiento con AgNC biogénicas derivadas de A. precatorius dio como resultado un patrón de escalera de ADN (entre 300 y 1000 pb). Sin embargo, varios grupos de investigación han observado la presencia de grandes fragmentos de ADN durante la apoptosis y han planteado la hipótesis de que se produce una gran fragmentación del ADN antes de la escisión del ADN internucleosomal, y que estos grandes fragmentos posiblemente actúan como precursores de esta escisión53,54.

Además, se produce daño genético y toxicidad en el cuerpo debido al estrés oxidativo que altera la expresión de enzimas antioxidantes en las células cancerosas55. Una estrategia clave para impulsar la quimioterapia es atacar el estado redox de las células cancerosas. Varias enzimas antioxidantes, incluidas GST, CAT y SOD, neutralizan las ROS intracelulares. Sin embargo, hay casos en los que los mecanismos de defensa antioxidantes son ineficientes para prevenir un equilibrio redox, que promueve los niveles de ROS56,57. Nuestros hallazgos mostraron que, en las células Hep2C, AgAPE (Mac) reveló la mayor actividad de SOD, catalasa, GST y un menor contenido de MDA, mientras que AgAPE (Sox) mostró el mayor contenido de GSH. Mientras que, en las células KB, AgAPE (Sox) exhibió mayor SOD, actividad GST, contenido de GSH y menor contenido de MDA, mientras que AgAPE (Mac) mostró los niveles más altos de actividad CAT. Investigaciones anteriores encontraron que los extractos de semillas de A. precatorius que comprenden flavonoides polifenólicos tenían actividad enzimática antioxidante in vitro en las células Hep2C y HeLa33. Sin embargo, hasta donde sabemos, no se ha probado ninguna investigación previa sobre la actividad de la enzima antioxidante de las AgNC derivadas de A. precatorius en células de cáncer de cuello uterino y oral. Estos resultados apuntan a la posibilidad de que interacciones específicas con la intrincada cascada de procesos redox celulares, incluida la mayor actividad de las enzimas antioxidantes y la disminución de los niveles de MDA en las células cancerosas de cuello uterino y orales, puedan dar como resultado un sistema de defensa antioxidante equilibrado y mostrar una actividad antiproliferativa significativa.

La angiogénesis se considera una de las características del cáncer, implicada en el crecimiento, la invasión y la metástasis del tumor. Los vasos sanguíneos tumorales podrían ser objetivos potenciales en la terapia contra el cáncer, ya que son genéticamente inestables y distintos de los vasos normales. Por lo tanto, la CAM se ha utilizado ampliamente en la investigación sobre angiogénesis, invasión de células tumorales y metástasis debido a su naturaleza altamente vascularizada, que aumenta la eficacia del injerto de células tumorales, su alta reproducibilidad, facilidad de uso y rentabilidad58,59,60. Existe evidencia en la literatura de que el crecimiento de los vasos sanguíneos fue inhibido por nanoconjugados de plata biogénicos derivados de Azadirachta indica y Saliva officinalis en modelos CAM59,61. De manera similar, en el estudio actual se observó antiangiogénesis luego de una reducción significativa en el grosor, la ramificación y el brote de los vasos sanguíneos utilizando AgNC biogénicas de A. precatorius. Esto sugiere que las AgNC biogénicas de A. precatorius poseen propiedades antiangiogénicas.

El estudio actual concluye que tanto los extractos de semillas de APE (Sox) como APE (Mac) de A. precatorius comprendían compuestos bioactivos potenciales, como lo confirma el análisis GC-MS. Se identificaron varios compuestos bioactivos, incluidos el safrol, el ácido linoleico y el ácido 9-octadecenoico, y estos compuestos podrían usarse en el futuro para aislarlos y purificarlos con fines terapéuticos.

Este es el primer estudio hasta donde sabemos con énfasis en la síntesis de nuevas AgNC biogénicas a partir de extractos de semillas de acetato de etilo de A. precatorius empleados como agentes reductores y de protección. Además, ambas AgNC mejoraron considerablemente su acción antiproliferativa contra las células Hep2C y KB. En la investigación actual también se destacaron las afinidades de unión más fuertes de los compuestos bioactivos identificados contra los receptores clave del cáncer cervical y oral, lo que indica que es probable que los compuestos bioactivos de los extractos de semillas de A. precatorius sean efectivos contra las proteínas objetivo. Además, este es un hallazgo novedoso de que las AgNC biogénicas de A. precatorius poseen acción antiangiogénica.

Por lo tanto, de acuerdo con los hallazgos de este estudio piloto, nuestra investigación en curso se centra en el mecanismo de acción de estas AgNC biogénicas y su aplicación en el desarrollo de nuevas estrategias terapéuticas alternativas en biomedicina, particularmente para eficacias antiproliferativas y antiangiogénicas. Sin embargo, existen algunos desafíos asociados con las AgNC biosintetizadas, como la genotoxicidad, la ventana terapéutica, el perfil de seguridad y la farmacocinética, que también deberían abordarse en estudios futuros.

Las semillas de Abrus precatorius se adquirieron en el mercado público local Khari Baoli, Kucha Chelan, Chandni Chowk, Delhi, de acuerdo con las normas y legislaciones institucionales, nacionales e internacionales. Las semillas recolectadas se almacenaron en refrigerador a 4°C hasta su uso. La Dra. Sunita Garg (científica emérita, CSIR-NISCAIR) autenticó especímenes de vales conservados en el Museo y Herbario de Materias Primas, Delhi (RHMD), India, con el número de referencia NISCAIR/RHMD/Consult/2020/3697-98-233.

Los productos químicos de calidad analítica se adquirieron en Hi-Media y Merck, India. AgNO3, Et-Br y medicamentos estándar se compraron en Sigma-Aldrich, India. El reactivo MTT se compró en Merck, India. El medio de Eagle modificado por Dulbecco (DMEM), el suero bovino fetal (FBS), la estreptomicina (2500 U/ml) y la penicilina (5000 U/ml) se obtuvieron de Gibco (EE. UU.), India.

Las semillas se enjuagaron con agua para eliminar la suciedad y las partículas de tierra, luego se secaron y se molieron hasta obtener un polvo fino. Los extractos de semillas de acetato de etilo se prepararon utilizando dos métodos de extracción diferentes: Soxhlet y maceración según la metodología publicada previamente33.

Las muestras fueron denominadas APE (Mac) y APE (Sox); extracto de acetato de etilo preparado por maceración y método Soxhlet, respectivamente.

El análisis de la composición química de los extractos de semillas de acetato de etilo de A. precatorius se realizó mediante un método estandarizado con modificaciones menores62. Los extractos (0,1 mg/mL) se analizaron mediante cromatografía de gases-espectroscopia de masas (GC-MS) (8860/5977, Agilent, California, Estados Unidos) utilizando una columna capilar DB-WAX (30 m de largo x 0,25 mm de diámetro interior x 0,25 μm de espesor de película) y utilizando helio (pureza > 99,999%) como gas portador con un caudal constante de 1,0 ml/min. Los compuestos se detectaron en función del tiempo de retención relativo a los espectros de masas utilizando la biblioteca del Instituto Nacional de Estándares y Tecnología para GC-MS.

Los archivos SDF tridimensionales de 1-1-dietoxidecano, safrol, 1-undecanotiol, ácido 2-propenoico, ácido linoleico, ácido hexadecanoico, ácido 9-octadecanoico y 5-fluorouracilo se descargaron de la base de datos PubChem (https://pubchem.ncbi). .nlm.nih.gov/). Archivos PDB de estrógeno (PDB ID: 1ERR), glucocorticoide (PDB ID: 1M2Z), HER 2 (PDB ID: 3PP0), progesterona (PDB ID: 1SQN), VEGF (PDB ID: 1FLT) y FGFR 2 (PDB ID: 2PVF) se descargaron del banco de datos de proteínas (//www.rcsb.org). El acoplamiento molecular de los compuestos identificados con objetivos farmacológicos seleccionados se realizó utilizando Autodock Vina empleando una metodología publicada previamente33. Se utilizó Discovery Studio 2021 para observar la interacción de los aminoácidos con las moléculas.

Se prepararon por separado una solución acuosa (1 mM) de nitrato de plata (AgNO3) y extractos de semillas de acetato de etilo de 10 mg/ml. Se añadió 1 ml de cada extracto a 9 ml de solución de AgNO3 (1 mM) y se agitó a 200 rpm durante 60 min en un lugar oscuro a temperatura ambiente18. La mezcla de reacción se ajustó a un pH alcalino de 8, que se determinó como el pH óptimo ajustando inicialmente las mezclas de reacción de pH 6 a pH 10 usando una solución de NaOH 1,0 M. Las mezclas de reacción se centrifugaron a 12.000 rpm durante 20 minutos para obtener las AgNC63,64.

Las AgNC preparadas se denominaron AgAPE (Sox); nanoconjugado de plata de extracto de acetato de etilo obtenido por Soxhlet, AgAPE (Mac); Nanoconjugado de plata del extracto de acetato de etilo obtenido por Maceración.

Se registraron espectros UV-Vis para comprobar la reducción de nitrato de plata con extracto de acetato de etilo de A. precatorius utilizando un espectrofotómetro UV-Vis Systronics en el rango de 300 a 700 nm. Se utilizó un Zetasizer nano ZS (Malvern Instruments, Malvern) para determinar la distribución hidrodinámica promedio del tamaño de partícula y el potencial zeta de los nanoconjugados. Para preparar una suspensión bien dispersada, la muestra se diluyó primero con agua MilliQ y luego se sometió a ultrasonidos durante 10 minutos. Se utilizó un espectrofotómetro FT-IR (PerkinElmer, Frontier ATR/IR) para comparar los espectros IR de extractos de semillas de A. precatorius y AgNC en el rango λ de 4000–500 cm-1. La morfología estructural y el análisis elemental de las AgNC se estudiaron utilizando el microscopio electrónico de barrido ZEISS EVO y la espectroscopia de rayos X de dispersión de energía (EDX)65,66.

La actividad antiproliferativa de las AgNC derivadas de A. precatorius se evaluó utilizando el ensayo de 3-(4, 5-dimetiltiazol-2-il) -2, 5-difeniltetrazolio (MTT) en células Hep2C y KB de acuerdo con el protocolo estandarizado33. Se sembraron alrededor de 1 x 104 células/pocillo en placas de cultivo de 96 pocillos de fondo plano y se incubaron durante 24 h a 37 °C, 5% de CO2 y 95% de aire. Las células Hep2C se trataron con 5-fluorouracilo (12,5–400 μg/ml), AgAPE (Mac) (1,56–12,5 μg/ml) y AgAPE (Sox) (1,56–50 μg/ml)33. Además, las células KB se trataron con 5-fluorouracilo (12,5 a 400 μg/ml), AgAPE (Mac) (1,56 a 25 μg/ml) y AgAPE (Sox) (0,03 a 0,31 μg/ml). Se agregaron 10 μl de reactivo MTT (5 mg/mL) después de 48 h de incubación y luego las mezclas se reintubaron durante 3 h. El formazán resultante se disolvió en DMSO (100 µl). Finalmente, se midió la absorbancia de formazán a 570 nm utilizando un lector de microplacas automatizado (Bio-Rad, Illinois, EE. UU.). Los experimentos se llevaron a cabo por triplicado. Se comparó la absorbancia entre las muestras y el control negativo para determinar la viabilidad celular (%). También se determinaron los valores de IC50.

El porcentaje de inhibición se calculó utilizando la siguiente fórmula:

En placas de 60 mm, se cultivaron y recolectaron células Hep2C y KB después de exponerlas a dosis IC50 de AgNC y 5-fluorouracilo como control positivo. Luego se llevó a cabo la extracción de ADN utilizando un método de extracción estándar con fenol/cloroformo67. Se usó tampón TE para disolver el ADN extraído, luego se cargó en un gel de agarosa al 1% y se visualizó con un sistema gel doc.

La evaluación del efecto antioxidante de AgAPE (Sox) y AgAPE (Mac) en células Hep2C y KB se evaluó utilizando el protocolo estandarizado para la estimación de actividades enzimáticas, es decir, superóxido dismutasa (SOD), catalasa (CAT), glutatión-S-transferasa (GST). ) y contenido no enzimático, es decir, contenido de glutatión (GSH) y peroxidación lipídica (contenido de malondialdehído (MDA))68.

Utilizando un ensayo CAM in vivo, se evaluó la acción antiangiogénica de las AgNC. El presente estudio utilizó huevos de gallina recién fertilizados adquiridos en Kegg Farms Private Limited, Gurgaon, India. Brevemente, los huevos se limpiaron suavemente con etanol al 70% y se incubaron durante 8 días a 37 °C con un 85% de humedad. Se utilizó una aguja hipodérmica para perforar un pequeño agujero en el caparazón para ocultar el saco de aire. Se utilizó luz al trasluz para localizar un segundo orificio en el lado ancho del óvulo, directamente encima de la región vascular de la membrana embrionaria. Al inyectar presión negativa a través del primer orificio, se formó un saco de aire falso debajo del segundo orificio, lo que permitió que la CAM se separara del caparazón. Utilizando pinzas y tijeras estériles, se cortó una ventana de aproximadamente 1,0 cm2 en la cáscara por encima de la CAM desprendida el día 9. A partir de entonces, se administraron 12,5, 50 y 200 µg/huevo de AgAPE (Sox) y AgAPE (Mac), mientras que 300 µg/ Se cargaron huevos de estándar (5-fluorouracilo) en un disco de papel de filtro estéril. Los discos tratados y no tratados con AgNC se colocaron asépticamente en CAM en crecimiento. Las muestras de CAM tratadas se volvieron a colocar en la incubadora después de sellar las ventanas con parafilm estéril. La angiogénesis a lo largo del disco de papel de filtro se fotografió con una cámara del iPhone 13 (Apple inc., EE. UU.) después de 48 h de incubación a 37 °C69. Se utilizaron al menos 3 huevos por muestra y el experimento se repitió 3 veces.

Las imágenes digitales de las secciones CAM se recopilaron utilizando una cámara de iPhone 13 (Apple inc.). Luego, las imágenes se analizaron utilizando el software ImageJ. Para cada muestra se midió el área de los vasos contenidos en el sistema CAM. La actividad antiangiogenética resultante se representó como el porcentaje de inhibición de la angiogénesis en comparación con el control del vehículo (agua) para cada conjunto de muestras.

Los resultados estadísticos de tres experimentos independientes se informaron como media ± desviación estándar (DE). Para el análisis estadístico se realizaron análisis de varianza unidireccional (ANOVA) y la prueba de comparaciones múltiples de Tukey. Se consideró significativo un valor de p ≤ 0,05 en el análisis estadístico. Se utilizó GraphPad Prism versión 8.0.2 para realizar todos los análisis estadísticos.

Todos los datos generados o analizados durante este estudio se incluyen en este manuscrito (y su archivo de información complementaria).

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Los autores desean agradecer al Instituto Amity de Biotecnología, Universidad Amity, Noida, Uttar Pradesh, India, por proporcionar infraestructura y apoyo. Los autores desean agradecer al Instituto Amity de Investigación y Estudios Avanzados (Materiales y Dispositivos) de la Universidad Amity, Noida, Uttar Pradesh, India, por SEM y al Instituto Amity de Microbiología, Universidad Amity, Noida, Uttar Pradesh, India, por DLS. y potencial Zeta.

Laboratorio de Terapéutica y Diagnóstico Molecular, Centro de Biotecnología Médica, Instituto Amity de Biotecnología, Universidad Amity, Sector 125, Noida, Uttar Pradesh, 201313, India

Amritpal Kaur, Yash Sharma y Kumud Bala

Escuela Kusuma de Ciencias Biológicas, Instituto Indio de Tecnología, Delhi, Hauz Khas, India

Gagandeep Singh y Tapan K. Chaudhuri

Sección de Microbiología, Instituto Central de Investigación de Ayurveda, Jhansi, CCRAS, Ministerio de Ayush, Gobierno. de la India, Jhansi, India

Gagandeep Singh

Instituto Nacional de Biología, Noida, Uttar Pradesh, India

Anoop Kumar

Fundación Amity para la Alimentación y la Agricultura, Universidad Amity, Noida, Uttar Pradesh, India

Nutan Kaushik

Consejo Central de Investigación en Medicina Unani (CCRUM), Ministerio de Ayush, Janakpuri, Nueva Delhi, India

Asim Ali Khan

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Ap.K.: Metodología, Análisis formal, Validación, Curación de datos, Investigación, Redacción—Borrador original. YS: Investigación, Visualización, Metodología, Software. GS: Escritura: revisión y edición. AK: Recursos, Supervisión, Visualización. NK: Curación de datos, Recursos. TKC: Escritura: revisión y edición. AAK: Redacción: revisión y edición, KB: Concepción, Diseño, Metodología, Supervisión, Curación de datos, Redacción: revisión y edición, Administración de proyectos. Todos los autores revisaron el manuscrito.

Correspondencia a Kumud Bala.

Los autores declaran no tener conflictos de intereses.

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Kaur, A., Sharma, Y., Singh, G. et al. Nuevos nanoconjugados de plata biogénica de extractos de semillas de Abrus precatorius y sus eficacias antiproliferativas y antiangiogénicas. Informe científico 13, 13514 (2023). https://doi.org/10.1038/s41598-023-40079-8

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Recibido: 04 de noviembre de 2022

Aceptado: 04 de agosto de 2023

Publicado: 19 de agosto de 2023

DOI: https://doi.org/10.1038/s41598-023-40079-8

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